Поскольку из образцов летучих мышей, в которых были идентифицированы гриппоподобные последовательности, не было выделено никаких инфекционных вирусных частиц, авторы настоящего исследования во главе с Дэвидом Вентвортом из J. Институт Крейга Вентера в Роквилле, США, и Венджун Ма из Университета штата Канзас в Манхэттене, США, первыми рассмотрели вопрос о том, происходят ли последовательности от инфекционных вирусов гриппа или просто от эволюционных реликвий ныне несуществующих предков.
Используя опубликованную информацию о последовательностях, они синтезировали весь геном (который состоит из 8 генов) возможного вируса летучих мышей, последовательность которого была идентифицирована в 2009 году (который они назвали Bat09), и поместили его в клетки культуры ткани человека, чтобы проверить, могут ли вирусные последовательности (как это обычно делают вирусы гриппа человека) захватывают ресурсы и механизмы клетки для производства вирусов гриппа летучих мышей. Оказалось, что они могли: тысячи сферических частиц вируса гриппа отпочковались из человеческих клеток в культуральную среду.
Однако, когда они попытались заразить ряд клеток различных видов позвоночных (включая собак, свиней, норок, обезьян, человека и летучих мышей) частицами Bat09, они не смогли заразить ни один из них.
Два поверхностных белка гриппа, гемагглютинин (HA) и нейраминидаза (NA), расположены на поверхности вируса и, как известно, необходимы для проникновения вируса в клетки-хозяева и высвобождения вирусных частиц.
Поскольку HA и NA гриппа летучих мышей сильно отличаются от генов других вирусов гриппа, исследователи заменили эти два гена генами другого адаптированного в лаборатории вируса гриппа человека под названием PR8, который может инфицировать и размножаться в различных клетках позвоночных, а также в курице. яйца. Убедившись, что были заменены только последовательности генов, которые кодируют белки HA и NA, но не соседние последовательности, которые направляют упаковку гена в новые вирусные частицы гриппа летучих мышей, они обнаружили, что этот гибридный геном продуцирует вирусы, которые могут инфицировать и размножаться. в разных клетках позвоночных и в яйцах.
Подобно родительскому вирусу PR8, гибридный вирус также может инфицировать мышей и вызывать серьезное гриппоподобное заболевание.
Однако это, по-видимому, было вызвано в основном генами HA и NA, производными PR8, потому что, когда исследователи создали гибриды, подобные ранее, между Bat09 и вирусом свиного гриппа под названием TX98, который может инфицировать мышей, но не вызывает болезни, гибридные вирусы вели себя. похож на TX98. Когда они протестировали некоторые из 6 генов, которые все еще были от Bat09, они смогли показать, что они функционируют очень похоже на их аналоги от других (не летучих) вирусов гриппа. Один из них, например, NS1 летучей мыши, является мощным супрессором иммунного ответа хозяина.
Токсичность для мышей второго, называемого PB2, можно регулировать с помощью очень небольших изменений, которые сделали PB2 летучей мыши более похожим на известные очень токсичные или менее токсичные варианты.
Повторная сортировка (случайная комбинация частей генома из двух или более разных вирусов гриппа, коинфицировавших клетку-хозяина) ответственна за большинство пандемий гриппа, потому что у людей практически нет иммунитета против некоторых из этих новых реассортированных вирусов.
Основываясь на нескольких различных тестах способности Bat09 реассортироваться с вирусами гриппа других видов, выяснилось, что вирус гриппа летучих мышей имеет очень ограниченную генетическую и белковую совместимость с вирусами гриппа типа A или типа B и на самом деле может быть новым типом вируса гриппа, который делает перегруппировку маловероятной, если не невозможной.
«В совокупности», заключают исследователи, «в то время как наши данные предполагают, что вирусы гриппа летучих мышей являются аутентичными вирусами и дают новое представление об эволюции и базовой биологии вирусов гриппа, результаты также показывают, что они представляют небольшую пандемическую угрозу для люди."