Ген BRAF человека продуцирует белок (B-Raf), который является важным компонентом сигнального пути RAS-RAF, тем самым играя роль в нормальном росте и выживании клеток. Однако мутированные формы могут вызывать чрезмерную активность этого сигнального пути. Это, в свою очередь, приводит к неконтролируемому росту клеток и раку.Цель исследователей из отделения дерматологии MedUni Vienna — понять эти механизмы резистентности и, на следующем этапе, задержать или даже предотвратить развитие резистентности.
С помощью технологии протеомики теперь стало возможным получить первое представление о лежащих в основе механизмов. Ключевая технология масс-спектрометрии («протеомика дробовика»), в частности, позволяет идентифицировать и характеризовать белки из клеток человека. Белки ферментативно перевариваются, а образующиеся пептиды отделяются.«Мы смогли показать, что устойчивость к ингибитору BRAF связана с повышенной экспрессией лиосомного компартмента (примечание: сферические везикулярные клеточные органеллы), с повышенным связыванием клеток и с морфологическими изменениями в клетках, от сферических до веретеновидных», объясняет Пауличке.
Основываясь на этом профиле устойчивости, затем можно было продемонстрировать эффективность производного резерватрола M8, природного полифенола, содержащегося в основном в винограде. «В качестве клеточных моделей мы использовали клетки с индуцированной резистентностью и первичные клеточные системы, в которых были идентифицированы аналогичные сигнатуры. Затем стало возможным коррелировать экспрессию белков (которые были активированы в резистентных клетках) с плохой выживаемостью без прогрессирования заболевания с использованием срезов ткани. или сыворотки пациентов с меланомой », — говорит исследователь MedUni Vienna.
«Новые технологии, такие как« протеомика дробовика », позволили нам провести механистический анализ инновационных терапевтических подходов. Используя эти стратегии, стало возможным получить новое понимание основного механизма устойчивости к ингибированию BRAF, и, исходя из этого, мы может быть в состоянии разработать новые рациональные терапевтические концепции, а также прогностические и фармакодинамические биомаркеры », — говорит Пауличке.