Выделение ДНК растений: вдвое больше ДНК за меньшее время

Это еще больше усложняется тем фактом, что разные группы растений имеют разные соединения и, следовательно, могут потребоваться разные методы экстракции ДНК для получения достаточной высокомолекулярной ДНК в зависимости от вида, с которым вы работаете.Мёллер, Гивниш и их коллеги из Университета Висконсин-Мэдисон оценили новый метод выделения ДНК и сравнили его с двумя часто используемыми методами выделения ДНК из тканей растений. Новый метод основан на частицах парамагнитной целлюлозы MagnaCel (PMC) и изначально был разработан и разработан для криминалистических приложений, в которых присутствуют лишь незначительные количества ДНК.Полезность метода PMC сравнивалась как с методом колонок с диоксидом кремния (DNeasy Plant Mini Kit), так и с методом бромида цетилтриметиламмония (CTAB).

Это сравнение было проведено среди широкого спектра цветковых растений, от лилий до подсолнухов. Метод PMC оказался более эффективным и, в отличие от метода CTAB, не предполагает использования опасных химикатов.

Наиболее важно то, что выход ДНК из PMC был вдвое больше, чем у DNeasy или CTAB.«Мы стремились изучить методы, которые могли бы сократить время и трудозатраты, необходимые для надежного получения геномной ДНК из образцов листьев таксонов с очень широким диапазоном химического состава листьев», — говорит Гивниш.

Статистический анализ был проведен для проверки значительных различий в качестве и количестве ДНК, полученной между методами экстракции и различными тестируемыми видами. «Мы считаем, что это исследование представляет собой убедительный тест на эффективность выделения ДНК парамагнитной целлюлозы по сравнению с другими методами. Мы обнаружили, что набор для экстракции ДНК MagnaCel от Promega значительно превосходит экстракции CTAB и DNeasy, обеспечивая в среднем вдвое больший выход ДНК для 25 видов растений. в 21 семье и обеспечивает более стабильную чистоту ДНК на основе коэффициентов поглощения при 260 нм по сравнению с 280 нм и 230 нм », — объясняет Гивниш. «Преимущество подхода MagnaCel особенно велико при низких концентрациях ДНК».