В тесте на белок используется метод микропроцессоров, разработанный в лаборатории микро / нано / молекулярной биотехнологии Шуичи Такаяма. «Так же, как масло и вода остаются несмешиваемыми, мы используем два водных раствора, которые не смешиваются друг с другом», — сказал д-р Такаяма, профессор биомедицинской инженерии и макромолекулярных наук и инженерии. «Интересно, что эти растворы можно объединить в массивы, в то время как стандартные реагенты для тестирования белков без промывки обычно просто смешиваются вместе в растворе. Эта новая возможность позволяет впервые измерять несколько диагностических белков одновременно в условиях отсутствия промывки. тест формата стирки ".
Для проведения анализа несколько микролитров плазмы крови смешивают с полиэтиленгликолем и добавляют в лунку специального 384-луночного микропланшета. Затем микрокапли декстрана, содержащие комплементарные пары шариков с антителами, распределяются в микробассейны в лунке для образца.
Во время двухчасовой инкубации биомаркеры целевого белка плазмы диффундируют из фазы полиэтиленгликоля в капли декстрана и становятся зажатыми гранулами антител. Затем микропланшет считывают на имеющемся в продаже планшет-ридере.Команда продемонстрировала эффективность своего биоанализа, измерив белковые биомаркеры из цитокин-стимулированных клеток, а также из плазмы пациентов, перенесших трансплантацию костного мозга.
Определение уровней провоспалительных цитокинов и хемокинов в плазме крови может иметь решающее значение в диагностике болезни «трансплантат против хозяина» (GVHD) — основной причины смерти среди пациентов с аллогенной трансплантацией костного мозга.«Мы предполагаем, что наша удобная и высокоточная платформа будет широко использоваться академическими и клиническими исследователями для диагностики, а также для других приложений», — сказала Арлин Саймон, доктор философии, ведущий автор этой публикации. «Чтобы облегчить внедрение нашей технологии в исследовательские и клинические лаборатории, мы разработали специальные микропланшеты, которые можно анализировать с помощью имеющихся в продаже ридеров».