В настоящее время существует два метода сохранения ценного штамма мышей. Если хотя бы одна из оставшихся мышей является самцами и обладает здоровыми половыми клетками, лучшим вариантом является интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ИКСИ), процедура оплодотворения in vitro, при которой один сперматозоид вводится непосредственно в яйцеклетку.Однако, если оставшиеся мыши не могут производить здоровые половые клетки или они являются самками, исследователи должны обратиться к клонированию. Перенос ядра соматической клетки (SCNT) дает клонированных животных путем замены ядра ооцита ядром взрослой соматической клетки.
Ранняя версия этого процесса использовалась для производства овцы Долли в 1996 году.С тех пор методы SCNT продолжали развиваться. Ранее в этом году исследователи из Центра биологии развития RIKEN в Кобе, Япония, даже разработали метод, позволяющий избежать убывающей отдачи от повторного клонирования одной и той же клетки; Показатели успеха увеличились со стандартных трех процентов в клонах первого поколения до десяти процентов в первом поколении и 14 процентов в клонах более высокого поколения.
Тип соматической клетки, используемой для этого процесса, имеет решающее значение и во многом зависит от ее эффективности в производстве живых клонов, а также от простоты доступа и готовности к экспериментальному использованию. В то время как клетки кумулюса, которые окружают ооциты в фолликуле яичника и после овуляции, в настоящее время являются предпочтительным типом клеток, Drs. Сатоши Камимура, Ацуо Огура и его коллеги из RIKEN BioResource Center в Цукубе, Япония, задались вопросом, могут ли белые кровяные тельца (также известные как лейкоциты), собранные с легкодоступного участка, такого как хвост, быть эффективными донорскими клетками.
Такие клетки позволили бы повторный отбор образцов с минимальным риском для мыши-донора.Существует пять различных типов лейкоцитов, и, как и ожидалось, исследователи обнаружили, что лимфоциты — это тип, который функционирует хуже всего: только 1,7 процента эмбрионов развились в потомство. Самыми большими физически крупными лейкоцитами и, следовательно, их легче всего отфильтровать из образца крови, были гранулоциты и моноциты.
Ядра этих клеток работали лучше: 2,1% эмбрионов дожили до срока по сравнению с 2,7% для предпочтительного типа клеток, кумулюсных клеток.Производительность гранулоцитов была хуже, чем ожидалось, из-за гораздо более высокой скорости фрагментации ранних эмбрионов (22,6 процента): вдвое выше, чем при клонировании лимфоцитов, и в пять раз выше, чем при клонировании кумулюсных клеток. Исследователи не смогли определить, что могло быть причиной фрагментации, и намерены провести дальнейшие исследования, чтобы улучшить работу донорских клеток гранулоцитов.Хотя в этом исследовании протестированные клетки крови не превзошли показатель успешности кумулюсных клеток, исследователи впервые продемонстрировали, что мышей можно клонировать с использованием ядер периферических кровяных телец.
Эти клетки можно использовать для клонирования сразу после сбора с минимальным риском для донора, помогая создавать генетические копии линий мышей, которые не могут быть сохранены другими методами вспомогательной репродукции.
