«ИГХ — это наиболее часто используемый метод для отображения экспрессии белка в тканях. Однако характер экспрессии в сложных тканях, таких как поджелудочная железа, следует интерпретировать с осторожностью, поскольку полученные результаты в значительной степени зависят от доступности распознаваемого эпитопа (ов). «Доступность эпитопов на белках в срезах тканей заметно различается в зависимости от тканей, типа фиксации и техники окрашивания», — говорит Оскар Ског, доктор философии с кафедры иммунологии, генетики и патологии Университета Упсалы (Швеция).
Согласно доктору Скогу и его соавторам, клинические проявления диабета 1 типа являются результатом потери вырабатывающих инсулин бета-клеток в той части поджелудочной железы, которая известна как эндокринная (секретирующая гормоны) поджелудочная железа. Однако поджелудочная железа также содержит экзокринную ткань, которая вырабатывает пищеварительные ферменты, секретируемые в тонкий кишечник.
Исследователи изучили как эндокринную, так и экзокринную ткань поджелудочной железы, чтобы выяснить, были ли результаты специфичны для ткани, непосредственно пораженной диабетом 1 типа.Исследователи, которые являются участниками исследования по обнаружению вируса диабета (DiViD), проанализировали свежую ткань поджелудочной железы от живых, впервые диагностированных пациентов с диабетом 1 типа, вместо того, чтобы полагаться на обычно изучаемые посмертные ткани. Предыдущие сообщения были подтверждены с помощью ИГХ, показав выраженную и отчетливую гиперэкспрессию HLA класса I, особенно в эндокринной ткани по сравнению с экзокринной тканью.
При использовании количественных молекулярных методов, таких как вестерн-блоттинг, проточная цитометрия, количественная полимеразная цепная реакция (ПЦР) в реальном времени или анализ секвенирования РНК, не наблюдалось различий в уровнях экспрессии HLA класса I между эндокринной и экзокринной тканями в тканях. Пациенты с недавно начавшимся диабетом 1 типа.
Кроме того, не было обнаружено различий между образцами от пациентов с диабетом 1 типа и недиабетиков.Дальнейшие исследования не выявили серьезных различий в экспрессии матричной РНК для энхансом, специфичных для основного комплекса гистосовместимости класса 1, и связанных факторов транскрипции в изолированных островках, а также никаких различий в экспрессии цитокинов, которые, как известно, регулируют экспрессию HLA.
«Предполагается, что островковая гиперэкспрессия HLA класса I является важным шагом в развитии диабета 1 типа, обеспечивая так называемое плодородное поле для уже существующих аутореактивных Т-клеток. Наши результаты показывают, что эта модель может нуждаться в пересмотре», — отмечает Доктор Ског. «Результаты, представленные в нашем исследовании, дают важные подсказки для лучшего понимания того, как развивается это сложное заболевание».
Диабет 1 типа, ранее известный как ювенильный диабет, характеризуется разрушением бета-клеток поджелудочной железы, что приводит к отсутствию инсулина. На его долю приходится от 5% до 10% случаев диабета в мире.
Некоторые, но не все, случаи диабета типа 1 могут быть связаны с аутоиммунной реакцией, на которую влияют генетические факторы и факторы окружающей среды. Гены системы HLA, расположенные на хромосоме 6, кодируют антигенные гликопротеины, которые присутствуют на поверхности большинства клеток организма, включая В-клетки, Т-клетки и фибробласты. Лица с определенными вариантами генов HLA подвергаются повышенному риску развития аутоиммунных заболеваний, включая диабет 1 типа, псориаз и реактивный артрит.
Комплекс HLA помогает иммунной системе отличать белки организма от белков чужеродных захватчиков, таких как вирусы и бактерии. Область класса I комплекса HLA включает гены HLA-A, -B и -C; эти локусы кодируют тяжелую цепь молекул HLA-класса I.